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目前ღღ,抑郁症发病机制比较复杂ღღ,多数学者将其归因于单胺类神经递质假说ღღ:去甲肾上腺素(noradrenalineღღ,NE)及受体学说ღღ,5-羟色胺(5-hydroxytryptamineღღ,5-HT)及受体学说ღღ,多巴胺(dopamineღღ,DA)及其受体学说等ღღ,基于上述学说尚书好孕txtღღ,常见的造模方法如下ღღ。
大ღღ、小鼠被迫放在局限且不可逃避环境中(大鼠强迫游泳)或克服不正常体位而做挣扎活动(小鼠悬尾)ღღ,其将试图逃脱ღღ,随之感到逃脱无望ღღ,便产生类似行为绝望的不动行为ღღ,称为“行为绝望”ღღ。
2d内进行ღღ,第1天适应环境ღღ,即让大鼠在20~25℃的深水中强迫游泳15minღღ,取出后擦干ღღ,放入笼中ღღ,第2天尚书好孕txtღღ,在同一时间点ღღ、相同条件下进行大鼠强迫游泳5minღღ,记录不动时间ღღ。
用医用胶带把小鼠固定在金属磁铁棒上ღღ,将金属磁铁棒贴在仪器内上部ღღ,使被测小鼠呈倒立状态(在此过程中ღღ,避免小鼠触碰到仪器底部)ღღ,适应2min后ღღ,记录4min内的小鼠活动(小鼠在空中的挣扎及仅有的细小肢体活动)时间ღღ。此3类造模方法ღღ,能造成短暂的抑郁症状ღღ。本模型可维持整个实验阶段ღღ。
注意事项ღღ:水温是影响实验结果的一个很重要的因素ღღ,水温>25℃或水温<20℃都会显著增加动物游泳的不适感ღღ,缩短不动时间ღღ,其次ღღ,抑郁动物模型表现的“不动”是一种主动行为尚书好孕txtღღ,和游泳空间的大小无关ღღ。
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当大鼠受到不可阻挡或无法逃避的厌恶性应激(如电击)后贝斯特全球最奢华游戏官网ღღ,将其放在可以逃避电击环境中时ღღ,产生逃避行为欠缺的现象ღღ。
方法实验第1ღღ、2天给予大鼠30次不可逃避的足底电击(0.65mA)ღღ,每次电击持续30s贝斯特全球最奢华游戏官网ღღ,间歇期半随机18~42sღღ。第3天筛选可进行实验的大鼠给予可逃避电击30次ღღ,每次电击持续6sღღ,间歇期24sღღ。在30次训练周期中ღღ,逃避失败次数超过25次就可以认为获得无助模型建成ღღ。停止刺激后抑郁样症状持续时间不超过1周ღღ。
慢性不可预见刺激可模拟生活中遇到的各种“困难”ღღ,造成动物心理上的抑郁ღღ。慢性轻度应激是使动物长时间地接受温和应激刺激ღღ,模拟人们在日常生活中所遇到的“困难”ღღ。本实验模拟出了抑郁症的症状表现ღღ,同时也是模拟出人类抑郁症的重要特征ღღ,即快感缺乏ღღ。该模型与抑郁症具有高度的相似性ღღ,可以引起一系列与抑郁症患者相似的行为和神经系统的改变ღღ,是目前公认的经典模型之一ღღ,可能是最有效的抑郁症动物模型ღღ,传统抗抑郁西药氟西汀可以在一定程度上扭转这些变化ღღ。
方法ღღ:①禁水(24h)ღღ;②禁食(24~48h)ღღ;③夹尾(1min)ღღ;④热应激(45℃ღღ,5min)ღღ;⑤冰水游泳(4℃ღღ,5min)ღღ;⑥鼠笼倾斜45°ღღ,24hღღ;⑦明暗颠倒ღღ;⑧潮湿垫料10hღღ;⑨行为限制1~2hღღ;⑩电击足底(36V交流电ღღ,每隔1min刺激1次ღღ,每次刺激10sღღ,共30次)等各种不同刺激ღღ。接受慢性应激的动物单笼饲养ღღ。各应激因子按随机方法在3~4周内应用ღღ,每日给予1种刺激ღღ,每种刺激累计使用2~3次ღღ,使大(小)鼠无法预料何种刺激发生ღღ,以此避免动物适应ღღ。3~5周刺激结束后ღღ,抑郁症模型成功ღღ。本模型可维持≥20dღღ。
注意事项ღღ:耗时较长ღღ,劳动量大ღღ,结果不稳定ღღ,难重复贝斯特全球最奢华游戏官网ღღ。此外ღღ,本实验还有一大难点ღღ:造模的强度和时间难以掌握贝斯特全球最奢华游戏官网ღღ,实验组动物刺激过于强烈ღღ,动物会对应激产生耐受或者动物变得异常狂躁ღღ,刺激若过于温和ღღ,动物则不易产生抑郁样行为ღღ。
利血平是通过耗竭脑组织中的儿茶酚胺和5-HT贮存来抑制中枢神经系统ღღ。利血平是一种囊泡再摄取抑制剂ღღ,经过利血平处理的动物会出现上眼睑下垂ღღ、腹泻ღღ、心动过缓ღღ、体温下降等症状ღღ。
方法ღღ:大(小)鼠腹腔注射利血平ღღ,1h后对小鼠进行行为观察及取材ღღ。腹腔注射利血平1h后ღღ,抑郁症模型成功ღღ。本模型可维持≥4hღღ。
注意事项ღღ:国际上对于利血平模型剂量没有统一的标准ღღ,国内有学者发现ღღ,4mg/kg的注射剂量建模比较稳定ღღ。该模型被广泛地用于新型抗抑郁药物的筛选ღღ,其缺点表现为选择性较差ღღ,如多巴ღღ、苯丙胺等具有反利血平作用ღღ,产生假阳性抗抑郁作用ღღ,可信性受到限制ღღ,目前仅用于抗抑郁药的初筛ღღ。
原理ღღ:5-HTP是5-HT的前体物质ღღ,经脱羧转变为5-HT起作用ღღ。给予单胺氧化酶抑制剂可抑制代谢ღღ,再给予抗抑郁药就可增强其典型的症状贝斯特全球最奢华游戏官网ღღ,即甩头行为ღღ。
方法ღღ:采用成年大(小)鼠ღღ,腹腔注射5-HTPღღ。腹腔注射5-HTP10min后ღღ,抑郁症模型成功尚书好孕txtღღ。本模型可维持≥30min贝斯特全球最奢华游戏官网ღღ。
原理ღღ:嗅球位于端脑前ღღ,与大脑皮层及皮层下脑结构存在广泛的神经联系ღღ,嗅球与边缘系统功能有关ღღ,影响行为ღღ、情绪和内分泌ღღ。手术切除双侧嗅球的大鼠表现出逃避不能(自主活动性增加和被动回避反应能力欠缺)和血浆类固醇激素升高ღღ,常伴有应激反应增强ღღ、进食和性行为改变等ღღ,这些症状与临床内源性抑郁患者的特征相似ღღ。
方法ღღ:水合氯醛腹腔注射麻醉ღღ,通过用左右耳杆插入到大鼠的外耳道底部贝斯特全球最奢华游戏官网ღღ,将大鼠头部固定在脑立体定位仪上ღღ,剪去头顶部的毛发ღღ,用碘酊与75%酒精消毒皮肤ღღ,在左右两耳连线的中点处ღღ,由前至后切开皮肤ღღ,暴露出颅骨ღღ,在距前囟前7~8mm处与颅骨顶部正中线mm的相交点处ღღ,用牙科磨钻将颅顶骨钻出两个直径约2mm的小孔贝斯特全球最奢华游戏官网ღღ,将微小探针伸入到小孔内ღღ,不断地从前至后与从左到右搅动ღღ,使嗅球被破坏成末糊状ღღ,再用橡皮吸引器将其轻柔地吸出到小孔以外ღღ,迅速将吸收性明胶海绵填充到小孔内止血ღღ,并缝合伤口ღღ。手术成功后尚书好孕txtღღ,该模型制备成功并可一直维持ღღ。